PCR:即聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，利用DNA 在体外95°C时解旋(变

性)，55°C时引物与单链按碱基互补配对的原则结合(退火)，再调温度至72°C左右, DNA

聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链(延伸)

PCR仪实际就是一个温控设备，能在95'C, 55°C, 72°C之间很好地进行温度控制。根

据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为:普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR

仪，实时荧光定量PCR仪等几类。

普通PCR仪:

-般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，称之为普通PCR仪，也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。

普通PCR仪主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。

梯度PCR仪:

PCR反应能否成功，退火温度是关键，梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置，根据结果，-步就可以摸索出最适反应条件。-次性PCR扩增可以设置-系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。

不同的DNA片段其最适合的退火温度不同，通过设置-系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。

梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样既节约时间，也节约成本。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。

梯度PCR仪多应用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应( Picymerase Chain Reaction，PCR为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。

原位PCR仪

PCR是提取细胞或组织中的DNA进行基因扩增反应，而原位PCR是保持细胞或组织的完整性，使PCR反应体系渗透到组织和细胞中，在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增。

不但可以检测到靶DNA，而且还可以了解靶DNA存在于何种细胞中，更有利于探讨靶DNA与细胞之间的关系。

原位PCR仪主要应用于：（1）检测外源性基因片段，提高检出率，集中在病毒感染的检查上，如HIV、HPV、HBV、CMV等；（2）观察病原体在体内分布规律；（3）内源性基因片段，如人体的单基因病、重组基因、易位的染色体、Ig的mRNA片段、癌基因片段等；（4）检测导入基因；（5）遗传病基因检测如β－地中海贫血。